牛奶和奶粉中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量測定分析條件的選擇

[db:作者] / 2022-12-21 00:00

15.2.2.7分析條件的選擇

(1)前處理方法的選擇

1)提取溶劑的選擇

QCA和MQCA等代謝物在牛奶和奶粉中與蛋白質以結合態存在，通常可采用酸水解、堿水解或酶解的方式將目標化合物與蛋白組織分離，本研究分別采用0.1mol/L EDTA-Mcllvaine緩沖溶液(pH=4)直接均質提取，用甲酸酶解，以及用乙腈+水(1+1，v/v)提取相比較，其中0.1mol/LEDTA-Mcllvaine 緩沖溶液回收率偏低，小于50%；乙腈+水(1+1，v/v)提取則用量比較大，操作繁瑣，而且分離效果不是很好；只有酶解的效果最好，不僅反應條件最溫和，且與奶制品分離最為徹底。溫度和pH對酶的生物活性影響極大，所以本方法選用Protease蛋白酶進行酶解，Protease在pH 8.5、溫度47℃時活性最強。酶解之前，先在樣品中加0.6%的甲酸溶液，置于47℃空氣浴中1h，使牛奶和奶粉中天然存在的酶失活；然后用Tris緩沖溶液調節pH，加入Protease蛋白酶，置于47℃空氣浴中過夜16～18h。

2)不同pH比較

本實驗比較了在不同pH條件下的凈化效果，結果表明，在pH=6～7偏酸性條件下效果最好，相比之下，pH<5和pH>8條件下的回收率都偏低。

3)固相萃取柱選擇

在樣品溶液中加入0.3mol/L HCI，使酶解液酸化后，采用陰離子交換固相萃取柱進行凈化，本研究對比了Bond Elute Certify II 和Oasis MAX兩種商用SPE柱的效果，結果表明Bond Elute Certify II在洗脫之后，回收率低于30%，掛柱效果明顯較差。而Oasis MAX的凈化效果和回收率優于前者，回收率可以達到60%以上。本研究對固相萃取所用溶液、流速控制、淋洗和被測物的洗脫等條件進行優化，根據化合物性質，用含2%甲酸的乙酸乙酯洗脫QCA和MQCA。

15.2.2.8 線性范圍和測定低限

在上述確定的儀器檢測條件下，取一系列標準溶液(n=8)，以分析化合物和內標化合物的峰面積比為Y軸，以分析化合物和內標化合物的濃度比為X軸作標準曲線，結果表明，2種分析化合物的濃度與峰面積值呈現良好的線性關系，見表15-8。

表15-8 各分析化合物濃度與峰面積的線性關系

百檢網就是一家權威的食品檢測機構，提供各種檢測需求服務，有任何疑問歡迎電聯或者在線咨詢客服。

上一篇：牛奶和奶粉中卡巴氧和喹乙醇代謝物殘留量測定步驟

下一篇：苯并咪唑類藥物殘留分析技術——提取方法

食品安全檢測服務聯系電話：13613841283

標簽:

食品安全網 ：https://www.food12331.com

上一篇：苯并咪唑類藥物殘留分析技術——提取方法

下一篇：返回列表